1.簡介
    在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號積累實(shí)時(shí)監(jiān)測整個(gè)PCR進(jìn)程，z后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。分為SYBRGreen法與TaqMan探針法。
    熒光染料法：實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)簡單（僅需2個(gè)引物，無需設(shè)計(jì)探針），初始成本低，靈敏度高，但需要進(jìn)行熔解曲線分析檢驗(yàn)擴(kuò)增反應(yīng)的特異性。適用于非特異性檢測（專一性要求不高或高通量檢測）。
    探針法：有高特異性（引物和探針共同于模板結(jié)合），高信噪比，能進(jìn)行多重反應(yīng)。但成本高，實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)繁瑣。適用于擴(kuò)增序列專一檢測。
2.服務(wù)流程

 

1. 送樣要求
（1）A：細(xì)胞、細(xì)菌、真菌、動植物組織等均可寄送，為了保證實(shí)驗(yàn)要求，樣品數(shù)盡可能準(zhǔn)備充足。

          注意事項(xiàng)
          1. 組織在1-2min內(nèi)完成取材，速凍，并立即放入-80℃或液氮中保存。
          2. 有條件的話，z好先將樣本在液氮中速凍，再轉(zhuǎn)入-80℃冰箱中保存。
          3. 使用的凍存管z好也用DEPC處理。
          4. 對于組織及細(xì)胞樣本，如果沒有液氮或-80℃冰箱，也可用RNAlater保存，但是組織一定要切成比較小的塊狀，-20℃保存運(yùn)輸。
      B：細(xì)胞沉淀：細(xì)胞量大于10^6的細(xì)胞/組；細(xì)菌沉淀：細(xì)菌量大于10^8的細(xì)菌/組；
      C：土壤、污泥樣本：至少10g；
      D：環(huán)境水樣：至少1L/組，寄送裝有過濾定量水樣的濾膜（4°C），干燥寄送。 如果其他樣品寄送需求，請與工作人員溝通確認(rèn)！
（2）待測樣品為RNA樣品及cDNA樣本，RNA濃度不低于200ng/uL，DNA濃度不低于20ng/uL，核酸體積10uL/檢測基因，且樣品接收后需先進(jìn)行質(zhì)檢，質(zhì)檢合格的開展后續(xù)項(xiàng)目（核酸樣本需包裝完整，離心管用封口膜封閉，干冰寄送）。
（3）不接受具有致病性的樣品。
（4）待測樣品（原始樣品或者RNA或者cDNA，原始樣品可由我們代處理，RNA樣品及cDNA樣本接收后需先進(jìn)行質(zhì)檢，質(zhì)檢合格的開展后續(xù)項(xiàng)目）;
（5）提供所需的引物/標(biāo)準(zhǔn)品（或平臺代設(shè)計(jì)及合成）；提供檢測基因的序列和引物序列，若基因序列來自文獻(xiàn)等其他途徑，可以多參考幾組，避免引物特異性不足，延長實(shí)驗(yàn)周期。
（6）其他所涉及的細(xì)胞、試劑盒以及生物耗材等平臺都可以有償提供。